Determination de la fraction mutee de NPM1 par dPCR dans les LAM (French Edition)

La mutation du gene NPM1 (Nucleophosmine) represente d’une des mutations acquises les plus frequemment observees dans les leucemies aigues myeloides (LAM). Parmi les nombreux types de mutants NPM1, la mutation de type A represente 80% des mutants. Le suivi de ce marqueur est indique en routine dans la prise en charge des LAM. Ce suivi est actuellement realise par la RT-qPCR. Les resultats sont exprimes en ratio <> de mutants NPM1, et necessite l’utilisation d’un gene de reference.La PCR digitale, est une technologie recente qui permet la quantification absolue d’un evenement genetique rare. Les points forts de la PCR digitale sont nombreux: gene de reference identique a la cible recherchee, sensibilite quasi identique a la RT-qPCR, absence d’utilisation de gamme plasmidique .Dans ce contexte, nous avons mis au point une methode de PCR digitale pour le biomarqueur NPM1 type A en determinant des parametres optimaux de la technique pour cette detection. En conclusion, la PCR digitale apparait comme un outil pertinent dans le suivi de la maladie residuelle.